一韦仪器HG24高通量组织研磨仪｜新鲜绵羊背最长肌前处理 磷酸化蛋白组检测

一韦仪器HG24高通量组织研磨仪｜新鲜绵羊背最长肌前处理 磷酸化蛋白组检测

实验目的：羊肉磷酸化蛋白对温度极敏感，研磨产热极易造成磷酸基团丢失HG24间歇式密闭湿磨，控制温升，充分破碎新鲜绵羊肌肉，保留磷酸化修饰，用于磷酸化蛋白组、肉质调控蛋白修饰研究。

实验仪器和材料 

仪器：一韦仪器HG24高通量组织研磨仪

材料：新鲜绵羊背最长肌 60‑100 mg；2mL研磨管；3mm氧化锆珠；含磷酸酶抑制剂蛋白裂解液

实验步骤

1.       去除筋膜脂肪，剪碎鲜肉；称量60‑100 mg，装入研磨管，2 3 mm氧化锆珠，加入500μL 含磷酸酶抑制剂裂解液。

2.       配平上样，关闭仓盖。

3.       参数设置：50 Hz；研磨30 s，间歇30 s；循环4次。

4.       研磨结束冰浴，离心取上清，用于磷酸化蛋白提取。

实验数据

结论：一韦仪器高通量组织研磨仪HG24采用短研磨长间歇的程序抑制研磨温升，最大程度保留蛋白磷酸化修饰位点。密闭管磨模式样品损失少，平行样稳定性好，适用于羊肉肉质分子修饰机制相关蛋白组学前处理。